翟羽佳
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陈嘉
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仉红刚
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张静
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张秋菊
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修瑞娟
腐蚀科学与防护技术
doi:10.3881/j.issn.1000-503X.2011.03.019
目的研究N-(6-氨乙基)-5-氯-1-萘磺酰胺（W7）在体外对人脂肪间充质干细胞（hADSCs）转分化为内皮细胞（EC）的影响。方法"以含40-ng/ml血管内皮生长因子（VEGF）和10-ng/ml碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的干细胞无血清分化培养基进行细胞培养，分为空白对照组（不含W7的分化培养基）和高（30-μmol/L）、中（20-μmol/L）、低（10-μmol/L）剂量W7组。hADSCs加药8-d后，采用流式细胞术（FCM）检测各组EC von Willebrand因子(vWF)和血管选择性钙黏素（VE-Cadherin）表型变化，激光共聚焦显微镜检测钙荧光探针（Fluo-3）标记的细胞内［Ca2+］i变化；同时将W7处理后的hADSCs种植在Matrigel胶上，观察细胞成血管能力；采用Western blot技术分析不同浓度药物处理8-d后细胞外调节激酶（ERK）和磷酸化ERK(p-ERK)变化。结果"分化至8-d时，与空白对照组相比，hADSCs转分化后的细胞VE-Cadherin 和vWF表达量随W7浓度降低而显著上升（P＜0.01），胞质［Ca2+］i显著升高（P＜0.01）。W7干预组的培养细胞均有管腔样血管结构形成，空白对照组的细胞无血管管型形成。与空白对照组相比，不同剂量W7干预组间细胞的ERK表达水平差异无统计学意义（P＞0.05）；随着W7浓度的降低，p-ERK表达水平明显升高（P＜0.05）。结论"适当浓度的W7可促进hADSC向EC诱导分化，其机制可能与促进细胞内［Ca2+］i增加，激活细胞分化过程中的ERK/MAPK信号通路有关。
关键词:
N-(6-氨乙基)-5-氯-1-萘磺酰胺
,
human adipose-derived mesenchymal stem cells
,
endothelial cells
,
induce differentiation
